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酶標儀檢測黃曲霉毒素的正確方法

作者:admin    時間:2021-04-01 09:21:39    點擊次數(shù):1387
 

黃曲霉毒素B1是自然界中*強的致癌物之一。它普遍存在于玉米、花生、巴西堅果和棉籽中。由于霉菌毒素的毒性,歐洲對黃曲霉毒素B1的限量為2ppb,對總黃曲霉毒素的限量為4ppb。

該酶標儀可快速、準確地檢測谷物、飼料等食品中的黃曲霉毒素B1,下面小編就如何使用酶標儀檢測黃曲霉毒素的正確方法做如下講解。

一、檢測原理

黃曲霉毒素B1檢測試劑盒是基于直接競爭酶聯(lián)免疫吸附法的原理。

(1)樣品提取物或黃曲霉B1標準品100ul,酶聯(lián)共軛物200ul,混合后取100ul。

(2)加入抗體包覆的微孔中,等待15分鐘。

(3)洗板去除不參與抗原抗體反應(yīng)的黃曲霉毒素B1,

(4)將酶底物100ul加入微孔中,等待5分鐘,顏色變藍,顏色與黃曲霉毒素B1含量成反比,

(5)加入100ul的終端液,顏色變黃。

二、測試步驟

1. 取5ml固體或液體樣品,加入70%甲醇25ml,混合3分鐘,休息10分鐘,過濾,收集濾液,吸濾液100ul,加入分析緩沖液100ul,混合。

2. 取出涂有抗體的綠色稀釋孔和無色稀釋孔,分別放在平板架上。

3.將酶偶聯(lián)物200ul加入綠色稀釋孔中,然后分別從標準樣(0,2,5,20,50ppb)和步驟1待測混合樣品中分別吸收100ul,混勻3次。

4. 將100ul的混合液加入無色抗體包被稀釋孔中靜置15分鐘。

5. 將液體倒入小孔中,用蒸餾水沖洗每個小孔。將微孔倒掛在紙巾上,瀝干水分。

6. 加入100ul基材靜置5分鐘,直至顏色變藍。

7. 加入100ul的終端液,顏色會變黃。

8. 機器測試(酶標濾鏡450nm,微分濾鏡630nm)

9. 稀釋因子f

10. 定量限:原料奶0.002ug/kg,

11. 牛奶或花生醬≤20ug/kg,合格,

12. 計算公式:X= c*f

注意:

1. Assay Buffer Assay Buffer Assay Buffer Assay Buffer Assay溶液

2. 使用前應(yīng)將套件還原至室溫(18~30度)。使用后應(yīng)置于2~8度冰箱內(nèi)保存

3.標準樣品含有毒素和致癌性。使用時應(yīng)戴橡膠手套、安全眼鏡、工作服等防護裝備

4. 在讀數(shù)前,微孔中不能有氣泡,否則會影響分析結(jié)果

5. 標準曲線相關(guān)系數(shù)r≥0.9850

6. 請嚴格遵守指定的操作時間,否則數(shù)據(jù)將無法讀取

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